Les femelles sont généralement plus grosses et longues que les mâles. Les mâles peuvent avoir les ergots plus long que les femelles mais n'est pas pas un indicateur suffisamment fiable pour déterminer le sexe des Regius.
Pour distinguer les mâles des femelles, on peut pratiquer soit l'éversion des hémipénis, soit le sondage au fil de Nylon ou à la sonde. Le sondage est la solution la plus appréciable mais à réaliser par quelqu'un d'expérimenté.